Lấy bối cảnh Hồng Kông những năm 1960, "Chị Em Ngọc Trai" xoay quanh cuộc chiến giành quyền thừa kế công ty của một thương gia trang sức. Vị tỷ phú hấp hối giao cho con gái cả Chu Pik-Wan tiếp quản công ty với sự giúp đỡ của con gái thứ hai Chu Pik-Ha, người vừa trở về nhà sau cái chết của chồng, và cô con gái út Chu Pik-Lam vẫn đang đi học. Mâu thuẫn giữa hai chị em nảy sinh khi Pik-Wan nghi ngờ chồng mình, Ho Cheung-Hing, vẫn còn ấp ủ những ham muốn bất chính với Ha. Khi một người phụ nữ bất ngờ xuất hiện và tự xưng là tình nhân của cha họ, liệu hai chị em nhà Chu có thể gạt bỏ bất đồng và đoàn kết chống lại kẻ thù chung?
Sau 1 thời gian giải tán, đội điều tra D.I.E đã được khôi phục. Vu Tử Lãng (Quách Tấn An), Trương Chính Nghĩa (Quách Chính Hồng) và các thành viên cũ lại gặp nhau, cùng chung tay điềutra các vụ án kỳ lạ. Bà mẹ trẻ Hình Tinh Tinh (Quách Thiện Ni) cũng muốn chứng tỏ tài năng nên ẵm con trở về đội tham gia phá án. Tử Lãng phản đối không được, đành nhờ mọi người thay phiên chăm sóc con trai. Trong quá trình điềutra, Tinh Tinh phát hiện con trai thừa hưởng khả năng kỳ lạ của Tử Lãng. Vì muốn chứng minh bản thân điều tra vụ án không thua kém chồng, Tinh Tinh thường xuyên dựa vào năng lực của con trai để tìm manh mối. Cũng vì chuyện này mà khoảng cách giữa hai vợ chồng ngày càng xa. Tử Lãng phát hiện em gái của Tinh Tinh, Hình Bội Bội (Hồ Định Hân) luôn bị kẻ gian lợi dụng, Tinh Tinh và con trai anh chính là mục tiêu của hắn. Tử Lãng bị đụng xe ngất xỉu đến mức hồn rời khỏi xác, chỉ có thể đứng nhìn vợ con gặp nguy hiểm. Tình huống cấp bách anh đành nhập hồn vào Chính Nghĩa...
Trong sở cảnh sát có một “ĐỘI ĐIỀU TRA ĐẶC BIỆT” tiếng tăm lẫy lừng. Cảnh sát nào bị cấp trên thuyên chuyển đều được đưa tới đây, phụ trách điều tra các vụ “án lạnh”, tức là những vụ án bế tắc. Vu Từ Lãng (QuáchTấn An) vốn có khả năng thần giao cách cảm và từng phá nhiều vụ án lớn. Khi thuyên chuyển về đây, Lãng cứ tưởng sắp được thăng chức đội trưởng, sau mới biết đội trưởng hiện tại còn lâu mới về hưu, anh đã liên tục phá án lập công, mong sớm được chuyển đi chỗ khác. Ngay lúc đó nữ cảnh sát Hình Tinh Tinh (Quách Thiện Ni) được chuyển tới, Tinh có tướng mạo xinh đẹp nhưng cố tình làm ra vẻ thô lỗ cộc cằn. Khi điều tra Tinh luôn quan niệm “Thà giết lầm chứ không bỏ sót”, thường tranh cãi với Lãng, khiến quan hệ đồng nghiệp của hai người ngày càng tồi tệ.